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天狼星红比色法体外定量检测可溶性胶原

发布者:新宝gg—创造奇迹登录    发布时间:2021-11-25     
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胶原蛋白(Collagen)是动物结缔组织的主要组成成分,主要存在于动物皮、骨、肌腱等组织中,发挥支架作用和保护作用。胶原蛋白在心脏中起着重要的结构作用。心脏细胞外基质主要由纤维状胶原组成,可保持心肌完整性,允许心脏力传递,并有助于心肌细胞定向。任何对胶原合成、合成后组装、翻译后修饰和降解的精细平衡调节的中断都可能对心肌功能产生重大影响。此外,胶原蛋白具有多种临床用途。胶原蛋白已广泛用于整容手术,以帮助烧伤患者的愈合过程。胶原蛋白还被用于在牙科、整形外科和其他外科手术中重建骨骼。胶原蛋白被用于骨移植,因为它的三螺旋结构使其成为一个非常强大的分子。同时,胶原也最适合用于骨骼,因为它不会损害骨骼的结构完整性。最后,人类和牛胶原蛋白都被用作皮肤填充剂来治疗皱纹和皮肤老化。

胶原蛋白

 

胶原蛋白中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量较高,特别是甘氨酸的含量几乎占了1/3,脯氨酸和羟脯氨酸的含量是各种蛋白中含量最高的,其中羟脯氨酸在其他蛋白质中鲜少存在,羟脯氨酸残基可通过形成分子内氢键稳定胶原蛋白分子。三条α-肽链借范德化力、氢键及共价交联则以平行、右手螺旋形式缠绕成“草绳状”三股螺旋结构,使胶原具有很高的拉伸强度胶原蛋白一级结构的特征是含有甘氨酸的三联体(Gly-X-Y)重复排列,其中X、Y多为脯氨酸和羟脯氨酸,通常由3条多肽链构成三股螺旋结构。

 

作为专业的生命科学医药原料供应商,Cell Biolabs中国区金牌代理,新宝gg—创造奇迹登录为您推荐:可溶性胶原蛋白定量检测试剂盒,cat#MET-5016,为检测细胞或组织样本中的可溶性胶原蛋白提供了一种方便的比色方法——天狼星红比色测定法,利用天狼星红与胶原蛋白特异性结合的原理,经NaOH洗脱离心后货得红色复合物,在特定波长540-560nm条件下通过测定吸光度确定胶原含量。

货号MET-5016
名称Soluble Collagen Assay Kit(可溶性胶原蛋白定量检测试剂盒)
样本细胞或者组织样本,不推荐用于血清、血浆或尿液样本
试剂盒组分1. Collagen Standard(胶原蛋白标准品)
2. Sirius Red Reagent(天狼猩红染料)
3. Extraction Solution(提取液)
4. 10XPBS
原理可溶性胶原蛋白检测试剂盒为检测细胞或组织样本中的可溶性胶原蛋白提供了一种方便的比色方法。 首先,将未知样品或胶原蛋白标准品添加到 96 孔板中并干燥过夜。 然后,加入天狼星红试剂对胶原蛋白的 [Gly-x-y] 三螺旋结构进行染色。 最后,染色的胶原蛋白用酸性试剂洗涤,用碱性试剂从平板上洗脱,转移到新的 96 孔板中,用平板分光光度计测量。 通过与预定的胶原标准曲线进行比较来确定未知样品中的胶原含量。
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实验结果

可溶性胶原标准曲线

 可溶性胶原标准曲线

检测鸡肝中的可溶性胶原蛋白

检测鸡肝中的可溶性胶原蛋白:根据样品制备部分,将鸡肝在含有0.1 mg/mL胃蛋白酶的2.5%乙酸中匀浆,中和pH,加入PBS。

 

发表文献:

1.Alqahtani, M.S. et al. (2020). Wound-healing potential of curcumin loaded lignin nanoparticles. J Drug Deliv Sci Technol. doi: 10.1016/j.jddst.2020.102020.

2.Sears, V. et al. (2020). Harnessing mesenchymal stem cell secretome: effect of extracellular matrices on pro-angiogenic signaling. Biotechnol Bioeng. doi: 10.1002/bit.27272.

3.MacKnight, H.P. et al. (2019). The interaction of ceramide 1-phosphate with group IVA cytosolic phospholipase A2 coordinates acute wound healing and repair. Sci Signal. 12(610). pii: eaav5918. doi: 10.1126/scisignal.aav5918.

4.Imai, J. et al. (2019). Flagellin-mediated activation of IL-33-ST2 signaling by a pathobiont promotes intestinal fibrosis. Mucosal Immunol. 12(3):632-643. doi: 10.1038/s41385-019-0138-4.

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